根据实际情况，调查人员要根据交通规则、当事人之间的行为和因果关系等，判断事故责任的主体。比例的确定可以根据责任人的违章情况、安全措施的落实情况以及损害后果等方面来考虑。总体来说，二次交通事故的认定责任与一次事故相似，但由于牵涉到多方责任主体，因此，对于事故的调查和责任的认定可能更加复杂。在具体操作过程中，需要结合实际情况进行综合判断，并依法根据相关法律法规予以处理。
二次交通事故的认定责任原则上与一次交通事故的认定责任原则类似，主要包括以下几个方面：
1. 事故的发生及原因调查：调查人员要通过勘察现场、查阅相关证据和询问相关当事人等方式，了解事故的经过和原因。
2. 事故责任的认定原则：根据《中华人民共和国道路交通安全法》的规定，交通事故责任一般分为全部责任、主要责任、同等责任和无责任四种情况。根据实际情况，调查人员要根据交通规则、当事人之间的行为和因果关系等，判断事故责任的主体。
3. 事故责任的比例确定：如果事故责任主体有多个人员，调查人员还需要通过认定每个责任主体的过错程度，并据此确定责任的比例。比例的确定可以根据责任人的违章情况、安全措施的落实情况以及损害后果等方面来考虑。
4. 证据的收集与保护：调查人员需要对现场的物证、痕迹等进行收集和保护，有需要时可以通过调取监控视频、车辆黑匣子等方式获取相关证据。
总体来说，二次交通事故的认定责任与一次事故相似，但由于牵涉到多方责任主体，因此，对于事故的调查和责任的认定可能更加复杂。在具体操作过程中，需要结合实际情况进行综合判断，并依法根据相关法律法规予以处理。